2020年2月3日,武漢大學(xué)中南醫(yī)院影像科副主任張笑春發(fā)了一條朋友圈:“別迷信核酸檢測了,,強(qiáng)烈推薦 CT 影像作為目前 2019-nCoV 肺炎主要依據(jù)”,,并稱這是“一個一線影像醫(yī)生的大聲疾呼,!”
典型案例
天津一女性感染病例,1 月 21 日出現(xiàn)發(fā)熱后,,前后共做了三次核酸檢測均呈陰性,,2月1日第四次檢測后才呈陽性。
2020年2月5日,,國家衛(wèi)健委發(fā)布《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案(試行第五版)》,。其中最主要的一個變化是,將湖北省和其他省份的診斷分類標(biāo)準(zhǔn)區(qū)分開來,。在湖北省,,將原本的疑似病例標(biāo)準(zhǔn)拆分,原本的“老三條”:發(fā)熱,、白細(xì)胞或淋巴細(xì)胞減少,,以及肺部CT影像,被一分為二,,只要滿足前兩條即可視為“疑似”,,相當(dāng)于放寬了疑似標(biāo)準(zhǔn)。但同時,,將第三條肺部CT表現(xiàn)視為“臨床診斷”,,為湖北新增的一類診斷類別。確診標(biāo)準(zhǔn)則沒有改變,,仍是試劑盒檢測陽性和基因測序與新冠病毒同源,。
張笑春后來發(fā)文回應(yīng)稱,并非否定核酸檢測結(jié)果,,而是認(rèn)為其作為檢測的最終手段,,目前仍受到產(chǎn)量、采樣方式等限制,,武漢無法在現(xiàn)階段完全依賴核酸檢測去篩查病人,,達(dá)到切斷傳染源的防控效果。到此,,CT和試劑盒的爭論暫時畫上了句號,。
到現(xiàn)在,我們已清楚地知道,,確診的手段是新冠病毒核酸檢測陽性,,擺在我們面前的是,如何提升它的檢測能力,,我們知道核酸檢測環(huán)節(jié)多,,包括:樣品采集、核酸提取,、試劑檢測,。每一個環(huán)節(jié)都很重要,,下面就樣品采集這一環(huán)節(jié)談?wù)勀壳扒闆r下的制肘。
在新冠病毒核酸檢測中,,有一個起關(guān)鍵作用的步驟,,就是樣品采集,為什么呢,?我們來看看以下分析:
據(jù)臨床樣本分析,,新冠病毒在人體咽部、痰液,、肺的病毒含量是由低到高,,下圖也展示了不同部位的一個采集方法,以及方法比較,。最有效的是采集肺泡灌洗液,,但由于臨床路徑太復(fù)雜了,受到了一定的局限性,。
肺泡灌洗液(BACF)采集的臨床路徑:
(注:上圖BACF采集是收集肺灌洗液)
所以結(jié)論是:對于疑似患者的篩查工作,,目前咽拭子采集是最可行的方法。同時也帶來一個疑問:
成熟的咽拭子采集方法為什么就變得力不從心呢,,成為核酸檢測漏檢的影響因素,?
我們知道,,盡管咽拭子采集具有很多的優(yōu)越性,,但也由于疫情的急迫,效果打了個“折扣”,,下來我們來看看:
人手不足:目前等待核酸檢測人數(shù)大大超過檢測能力,,面對檢測量超負(fù)荷的狀態(tài)下,專業(yè)人員數(shù)量顯得捉襟見肘,,熟練化的人員更不夠,。每個醫(yī)護(hù)人員劃的輕重,多少都不一樣,。
采集難度大:這次疫情的醫(yī)護(hù)人員必須采取三級防護(hù)措施,,穿著厚重又嚴(yán)密的防護(hù)服,要實現(xiàn)精準(zhǔn)采樣,,難度很大。
還有一個客觀因素,,咽拭子作為最普遍的采樣方式,,本來病毒基數(shù)低,加上采樣手法的差異,、操作難度的加大,,很多病人咽拭子陰性,,但肺泡里有病毒。
針對上面的困難,,針對上面的困難,,我們也提出了解決方案:
增挼更多的醫(yī)護(hù)人員;
去掉作為醫(yī)護(hù)人員生命防線的防護(hù)服,,保證采樣質(zhì)量,;
提高采樣病毒量。
但是,,對于醫(yī)護(hù)人員人手方面,,目前來說增挼也是有限的,況且核酸檢測全過程對人員操作要求高,,馬上培訓(xùn)合格上崗,,時間不允許;同時,,醫(yī)護(hù)人員處在最前線,,去掉他們的防護(hù)服顯然也不可能,那么,,把希望都落到了提高采樣病毒量,,元芳怎樣看,如何就有限的病毒量提高檢測效率呢,?
顯然,,提高檢測病毒量這是可操作性最大的一個方向,擺在我們面前,,有三條路:
得到一致的共識是:
①路徑一行不通,,前面已經(jīng)分析過,目前情況下很難保證采樣的質(zhì)量,,要么換其他采集方式,。
②路徑二是可行的,是對樣本進(jìn)行濃縮富集,,在有限的病毒量提高利用率,。
③路徑三考慮的是多次咽拭子采集,混合一起濃縮富集,,有效的避免單次操作的不穩(wěn)定性,,相對路徑二,更為科學(xué)有效的篩查方案,。
所以,,濃縮富集,對于提高檢測效率,既科學(xué)又有效,!
我們來看兩個案例,關(guān)于濃縮富集后帶來的提效,。
美國CDC對環(huán)境中病毒的收集與檢測,,將氣溶膠樣品匯集并用CP Select進(jìn)行H7N2檢測。在InnovaPrep濃縮移液管中將混合樣本K01,、K02和K08的A(H7N2)卵接種量增加約33倍,,導(dǎo)致M1拷貝數(shù)增加47倍。同樣地,,濃縮樣品K03大約22倍導(dǎo)致M1拷貝急劇增加2x107-8倍,,并使血凝檢測成為可能,最終HA滴度為512HA單位(HAU)/50_l尿囊液”,。
下圖左邊是從100ml樣品中取1ml檢測結(jié)果,;右邊是將100ml樣品濃縮后取樣檢測結(jié)果。濃縮富集可以大大改善檢測限,,降低漏檢風(fēng)險,,確保結(jié)果穩(wěn)定可靠。幾分鐘可得到高濃縮液體樣本,,再用PCR等快檢方法幾個小時得到結(jié)果,。
目前我司提供的病毒濃縮富集系統(tǒng)解決方案:CP Select,可以通過視頻了解到,,幾分鐘時間就可以把幾百毫升的液體濃縮至幾百微升,。
該設(shè)備具有以下優(yōu)點:
10萬倍以上的無損濃縮,,濃縮后體積減少至幾百微升;
3分鐘濃縮1L液體中的病毒至幾百微升,,直接PCR或測序儀等,,幾小時出結(jié)果;
多樣品富集成一個,,上機(jī)可以提高檢出率的同時提高效率和減少試劑成本,;
快速完成低濃度固、液體濃縮至高濃度液體制備樣,,非常適用于呼吸道病毒,、腸道病毒等病原微生物監(jiān)測。
相對傳統(tǒng)方法我們能夠做到成倍的增加痕量檢測的可能性,,同時大大減少時間和勞動力,。
在致敬一線醫(yī)護(hù)人員的同時,,
我們檢測人希望在抗擊疫情戰(zhàn)斗中,
貢獻(xiàn)出一份力量,,
眾志成城,共度時艱,。