近年來(lái),,英國(guó)食品標(biāo)準(zhǔn)局一項(xiàng)為期一年的調(diào)查結(jié)果顯示,73%的英國(guó)超市所售鮮雞肉攜帶易導(dǎo)致食品中毒的空腸彎曲桿菌,,而且其中19%屬于重度感染,。調(diào)查還發(fā)現(xiàn)7%的雞肉包裝攜帶了彎曲桿菌,極易導(dǎo)致其他食品的交叉感染,。
本期將帶大家了解空腸彎曲桿菌
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什么是空腸彎曲菌
空腸彎曲菌為革蘭染色陰性,。菌體輕度彎曲似逗點(diǎn)狀,,菌體一端或兩端有鞭毛,運(yùn)動(dòng)活潑,,在暗視野鏡下觀察似飛蠅,,有莢膜,不形成芽胞,。
空腸彎曲菌為微需氧菌,,在含2.5~5%O?和10%CO?環(huán)境中生長(zhǎng)最好,在正常大氣或無(wú)氧環(huán)境中均不能生長(zhǎng),。最適溫度為37~42℃,。
電鏡下的空腸彎曲菌
空腸彎曲菌是全球廣泛關(guān)注的人畜共患病病原菌之一,它可以引起動(dòng)物-動(dòng)物,、動(dòng)物-人之間傳播的多種疾病,,給人類的健康安全帶來(lái)巨大威脅??漳c彎曲菌可造成腹痛,、水瀉、血便,、發(fā)燒,、惡心、嘔吐等不同程度的病癥,,雖多為自限性疾病,,但對(duì)年幼的兒童、老年人以及免疫抑制人群可能具有致命性,。此外,,部分人群可因感染彎曲菌而導(dǎo)致包括格林巴利綜合征、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎,、腸易激綜合征等多種后遺癥,。
人體主要通過(guò)糞-口途徑感染。通過(guò)污染的食品和水傳播,,也可通過(guò)昆蟲(chóng),動(dòng)物等直接接觸傳播,,但以食物和水的傳播為主,。人群普遍易感??漳c彎曲菌病學(xué)齡前兒童發(fā)病率較高,,目前研究發(fā)現(xiàn)我國(guó)成年人門診就診的腹瀉患者中空腸彎曲菌的檢出率約10%左右(數(shù)據(jù)來(lái)源:中國(guó)疾病預(yù)防控制中心)。國(guó)外的彎曲菌病感染通常由生食所致,,發(fā)展中國(guó)家畜禽的養(yǎng)殖和屠宰環(huán)節(jié)需要大量勞動(dòng)力,,提高了感染率。
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如何檢測(cè)空腸彎曲菌
國(guó)標(biāo)GB 4789.9-2014《食品微生物學(xué)檢驗(yàn)空腸彎曲菌檢驗(yàn)》采用樣品前處理、增菌,、分離,、彎曲菌屬的鑒定、空腸彎曲菌的鑒定的步驟檢驗(yàn)空腸彎曲菌,,是目前最常用的空腸彎曲菌檢驗(yàn)方法,。而對(duì)于確定為彎曲菌屬的菌落,可使用生化鑒定試劑盒或生化鑒定卡代替其中“空腸彎曲菌屬的鑒定步驟對(duì)空腸彎曲菌屬進(jìn)行鑒定,。
國(guó)標(biāo)空腸彎曲菌檢驗(yàn)程序
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如何對(duì)微生物進(jìn)行鑒定
API手工微生物鑒定系統(tǒng)之——API Campy鑒定系統(tǒng)
在1970年,,API徹底地改革了細(xì)菌學(xué)領(lǐng)域。當(dāng)時(shí)的鑒定技術(shù)實(shí)施復(fù)雜,,并且解讀困難,。API系統(tǒng)將當(dāng)時(shí)的鑒定技術(shù)引入標(biāo)準(zhǔn)化和微型化,使細(xì)菌鑒定變得簡(jiǎn)單,、快速和可靠,。
相信大家對(duì) API 并不陌生。API擁有當(dāng)前可用的最為廣泛的鑒定譜,。它包含16種鑒定系統(tǒng),,實(shí)際上覆蓋了所有菌屬,超過(guò)700種不同菌種,。
其中,,API Campy鑒定系統(tǒng)可用于彎曲菌屬的鑒定,該系統(tǒng)的數(shù)據(jù)庫(kù)可鑒定18種菌種,,可用于快速,、準(zhǔn)確、可靠地鑒定其中的空腸彎曲菌,。
該產(chǎn)品由20個(gè)含干燥底物的微型小管組成的,。它分為兩部分:試條的第一部分(酶和常規(guī)試驗(yàn))用濃的菌懸液接種,加入懸液后可以使底物溶解,。孵育(有氧條件下)過(guò)程中所產(chǎn)生的最終代謝產(chǎn)物通過(guò)自然反應(yīng)或加入附加試劑而變色,。
試條的第二部分(同化或抑制試驗(yàn))接種于最小培養(yǎng)基并且在微需氧條件下培養(yǎng)。如果能利用相應(yīng)的底物或能耐受測(cè)定的抗生素,,細(xì)菌就可以生長(zhǎng),。
最后結(jié)合數(shù)據(jù)庫(kù)即可得到鑒定結(jié)果。
- 24~48小時(shí)內(nèi)鑒定
- 標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)與最佳生長(zhǎng)條件組合而成的標(biāo)準(zhǔn)方法
- 操作簡(jiǎn)便有效
沒(méi)錯(cuò),,標(biāo)準(zhǔn)化,、小型化的API 生化測(cè)試鑒定條配合全面的鑒定數(shù)據(jù)庫(kù)使用,體現(xiàn)其高品質(zhì)與易用性,。
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API操作標(biāo)準(zhǔn)步驟
1,、收集樣本, 對(duì)待鑒定微生物進(jìn)行菌落分離
2,、通過(guò)革蘭氏染色、形態(tài)觀測(cè),、氧化酶測(cè)試,、觸酶測(cè)試等初步判斷微生物分類,選定對(duì)應(yīng)鑒定試條
3,、從2-8℃冰箱中取出API鑒定試條,,平衡溫度至常溫。在試條底座加入適量的水,,以保證培養(yǎng)過(guò)程中的濕度
4,、挑取一個(gè)或幾個(gè)純化好的菌落,放入相應(yīng)溶劑中,,制成對(duì)應(yīng)麥?zhǔn)蠞舛鹊木鷳乙?/span>
5,、按照要求,將相應(yīng)量的菌懸液加入對(duì)應(yīng)的試條反應(yīng)孔中,。對(duì)需添加礦物油的反應(yīng)杯,,添加適宜量的礦物油,并蓋好蓋子
6,、將試條放置在對(duì)應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境的孵育箱中培養(yǎng)至要求的時(shí)間
7,、培養(yǎng)結(jié)束后,根據(jù)說(shuō)明書(shū)中加入所需的附加試劑
8,、參照說(shuō)明書(shū)判讀結(jié)果,,并記錄生物數(shù)碼信息
9、查詢鑒定結(jié)果,。戳一下《為什么盒子只有三次結(jié)果查詢》,,關(guān)注一盒公眾號(hào),了解詳細(xì)操作并查詢
溫馨提示:空腸彎曲菌對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境的要求較高,,會(huì)影響檢出率,,故前期分離培養(yǎng)步驟要多加注意。
參考文獻(xiàn):
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